Apakah ELISA Microplate Reader?
Pembaca plat mikro, iaitu, ujian imunosorben berkaitan enzim, ialah instrumen khas untuk ujian imunosorben berkaitan enzim. Malah, ia adalah kolorimeter fotoelektrik khas atau spektrofotometer yang menyamar, dan prinsip kerja asasnya pada asasnya sama dengan struktur utama dan kolorimeter fotoelektrik. Ia hanya boleh dibahagikan kepada dua kategori, separa automatik dan automatik sepenuhnya, tetapi prinsip kerjanya pada asasnya sama. Terasnya ialah colorimeter, iaitu kaedah kolorimetrik digunakan untuk menganalisis kandungan antigen atau antibodi. Penentuan ELISA secara amnya memerlukan isipadu akhir larutan ujian kurang daripada 250μL, dan ujian tidak boleh dilengkapkan dengan kolorimeter fotoelektrik am, jadi terdapat keperluan khas untuk kolorimeter fotoelektrik dalam pembaca plat mikro.
Prinsip
Pembaca plat mikro sebenarnya adalah colorimeter fotoelektrik tujuan khas atau spektrofotometer berselindung, dan prinsip kerja asasnya adalah sama dengan struktur utama dan kolorimeter fotoelektrik. Rajah menunjukkan kerja pembaca plat mikro pensampelan automatik satu saluran. Gambarajah skematik. Gelombang cahaya yang dipancarkan oleh lampu sumber cahaya diubah menjadi cahaya monokromatik oleh penapis atau monokromator, dan memasuki spesimen yang diuji dalam kutub mikroporous plastik. Sebahagian daripada cahaya monokromatik diserap oleh spesimen, dan sebahagian lagi dihantar melalui spesimen Diterangi kepada pengesan foto, pengesan foto menukar isyarat cahaya yang berbeza bagi spesimen untuk diuji kepada isyarat elektrik yang sepadan. Isyarat elektrik diproses oleh pra-penguatan, penguatan logaritma, dan penukaran analog-ke-digital. Masukkan mikropemproses untuk pemprosesan dan pengiraan data, dan akhirnya memaparkan hasilnya dengan paparan dan pencetak. Mikropemproses juga mengawal pergerakan mekanisme pemacu mekanikal dalam arah X dan arah Y untuk menggerakkan plat mikro melalui litar kawalan, untuk merealisasikan proses pengesanan pensampelan automatik. Pembaca plat mikro lain menggunakan pergerakan manual plat mikro untuk pengesanan, jadi mekanisme pemacu mekanikal dan litar kawalan dalam arah X dan Y ditinggalkan, supaya instrumen lebih kecil dan strukturnya lebih ringkas.
Plat mikro ialah plat plastik lutsinar yang digunakan khas untuk meletakkan sampel yang akan diuji. Plat mempunyai beberapa baris lubang kecil dengan saiz seragam, dan antigen atau antibodi yang sepadan tertanam di dalam lubang. Setiap lubang kecil boleh memuatkan beberapa sepuluh mililiter larutan.
Cahaya ialah gelombang elektromagnet. Panjang gelombang 100nm-400nm dipanggil cahaya ultraviolet, cahaya antara 400nm dan 780nm boleh diperhatikan oleh mata manusia, dan panjang gelombang lebih daripada 780nm dipanggil cahaya inframerah. Orang hanya boleh melihat warna kerana cahaya mengenai objek dan dipantulkan kembali oleh objek. Tumbuhan hijau adalah hijau kerana kebanyakan tumbuhan menyerap cahaya merah-oren dan cahaya biru-ungu, tetapi mereka tidak menyerap dan memantulkan hijau, jadi tumbuhan kelihatan hijau. Prinsip pengukuran pembaca plat mikro adalah untuk mengesan penyerapan analit pada panjang gelombang tertentu.
Struktur
Terdapat plat 40-telaga, plat 55-telaga, plat 96-telaga, dan sebagainya. Instrumen yang berbeza menggunakan plat orifis yang berbeza, yang boleh diuji satu demi satu atau baris demi baris.
Cahaya monokromatik yang digunakan oleh pembaca plat mikro boleh diperolehi sama ada melalui penapis koheren atau monokromator yang sama seperti spektrofotometer. Apabila menggunakan penapis sebagai peranti penapis, ia adalah sama seperti colorimeter biasa. Ia boleh diletakkan di hadapan plat mikro atau di belakang plat mikro. Selepas pemeluwap, diafragma mencapai reflektor, ia dipantulkan oleh reflektor pada 90 ° dan melalui larutan kolorimetrik secara menegak, dan kemudian dihantar melalui penapis. Ke fotosel.
Daripada gambarajah blok kerja dan gambarajah laluan cahaya pembaca plat mikro, dapat dilihat bahawa ia mempunyai perbezaan berikut dengan colorimeter fotoelektrik biasa:
(L) Bekas untuk larutan kolorimetrik yang akan diuji tidak lagi menggunakan kuvet, tetapi mikroplat plastik. Plat mikro biasanya diperbuat daripada bahan polietilena telus, yang mempunyai kesan penjerapan yang kuat pada antigen dan antibodi, jadi ia digunakan Ia bertindak sebagai pembawa fasa pepejal.
⑵Oleh kerana plat mikro plastik yang mengandungi sampel berliang berbilang baris, cahaya hanya boleh melalui secara menegak, jadi pancaran cahaya pembaca plat mikro melalui larutan yang akan diuji dan plat mikro secara menegak. Pancaran cahaya boleh dari atas ke bawah atau Ia boleh melalui cecair kolorimetrik dari bawah ke atas.
⑶ Pembaca plat mikro biasanya bukan sahaja menggunakan A, tetapi kadangkala juga menggunakan OD ketumpatan optik untuk menyatakan penyerapan. Pembaca plat mikro boleh dibahagikan kepada dua jenis: saluran tunggal dan berbilang saluran, dan saluran tunggal dibahagikan kepada dua jenis: automatik dan manual. Jenis instrumen automatik Terdapat mekanisme pemacu mekanikal dalam arah X dan Y, yang boleh menghantar lubang kecil plat mikro L satu demi satu di bawah rasuk untuk ujian, dan jenis manual menggunakan pergerakan manual plat mikro untuk pengukuran.
Berdasarkan pembaca plat mikro saluran tunggal, pembaca plat mikro berbilang saluran telah dibangunkan. Pembaca plat mikro jenis ini biasanya diautomatikkan. Ia tidak mempunyai berbilang rasuk dan berbilang pengesan foto, seperti instrumen 12 saluran dengan 12 rasuk atau 12 sumber cahaya, 12 pengesan dan 12 penguat, di bawah tindakan peranti pemacu mekanikal dalam arah X, 12 sampel dikesan dalam barisan. Kelajuan pengesanan pembaca plat mikro berbilang saluran adalah pantas, tetapi strukturnya Harga yang lebih kompleks juga lebih tinggi.
Julat aplikasi pembaca plat mikro
Ujian hematologi Ujian antibodi berkaitan platelet PAIgA, PAIgG, PAIgM
Penentuan D-Dimer D-Dimer
Penentuan produk degradasi fibrin serum FDP
Penentuan T3, T4 dengan triiodothyronine dan tetraiodothyronine
Ujian imunologi Penentuan protein C-reaktif CRP
Penentuan imunoglobulin IgD, IgE
Penentuan kompleks imun yang beredar CIC
Penentuan faktor reumatoid IgG, IgA, IgM RF
Antibodi anti-thyroglobulin, penentuan antibodi mikrosomal TG, TM
Pengesanan imunologi kanser tumor Penentuan alpha-fetoprotein AFP
Penentuan antigen karsinoembrionik CEA
Penentuan PSA antigen khusus prostat
Penentuan kanser pankreas, kanser saluran hempedu, kanser gastrik CA19-9
Penentuan kanser ovari CA125
Penentuan kanser payudara CA15-3
Penentuan karsinoma sel skuamosa serviks SCC
Pengesanan kanser sumsum tulang berganda
Penentuan hTG kanser tiroid
Ujian imunologi penyakit berjangkit, ujian serologi hepatitis A, anti-HAV-IgM
Ujian Serologi Hepatitis B Dua setengah pasang
Pengesanan serologi Hepatitis C Anti-HAV-IgG, anti-HCV-IgM
Pengesanan serologi hepatitis D Anti-HDV-IgG, anti-HDV-IgM
Pengesanan serologi hepatitis E Anti-HEV-IgG
Pengesanan antibodi kepada demam berdarah dengan sindrom buah pinggang HFRS-IgG
Pengesanan antibodi virus Japanese encephalitis IgM
Pengesanan antibodi virus immunodeficiency manusia (iaitu, AIDS serantau) HIV β 2 M
Ujian fungsi penjagaan pranatal dan selepas bersalin Ujian virus Toxoplasma TOXO
RV pengesanan virus rubella
CMV pengesanan cytomegalovirus
Pengesanan virus herpes simplex Anti-HSV (Ⅰ, Ⅱ)
Orang lain juga boleh melakukan ujian genetik dan sisa haiwan, item pemeriksaan sisa racun perosak, dsb.
